陈年绍兴黄酒风味物质的分析与品质鉴定

作者：江超  学位年度：2010-01-01 学位授予单位：浙江大学 关键词：绍兴黄酒 挥发性风味物质 品质鉴定 HPLC GC 

描述：mL萃取,萃取时间10min。蒸馏法的最佳实验条件为先常压沸水浴蒸馏,然后余液减压蒸馏并通过冷阱在液氮冷凝条件下收集馏分。二氯甲烷萃取的最佳萃取条件为100mL酒样加氯化钠至饱和,二氯甲烷3×50mL萃取,萃取时间7min。 通过HPLC保留时间鉴定了石油醚萃取组分中一种主要的挥发性风味物质β-苯乙醇,并对3种陈酿年份同一品牌绍兴黄酒中的β-苯乙醇进行定量分析,数据表明β-苯乙醇的含量随酒龄增加而减少。 通过GC/MS分析和标样保留时间的对照,从蒸馏组分和二氯甲烷萃取组分中分别鉴定出13和33种挥发性风味物质;通过GC/FID分析6种陈酿年份同一品牌绍兴黄酒的蒸馏组分和萃取组分,分别定量检测出8和12种主要挥发性风味物质。分析数据的结果均显示:乙酸乙酯和乳酸乙酯的含量随陈酿年份的...

诗性·自由·审美

作者：竺建新  学位年度：2007-01-01 学位授予单位：浙江大学 关键词：吴越文化 诗性品格 心灵自由 自由意识 

描述：《受戒》重新步入文坛，显示出一种江南诗性文化色彩和审美情怀。他的作品规避政治，远离流行色，以一种贴近草根的乡土情怀，给民间群体以极大的关注，并且能够以一种简约、明白，而又优美含蓄的语言，构建一个充满地域风情和诗情画意的原生态的乡土世界，赋予人们最美好的人性和自由旺盛的生命形态。汪曾祺小说追求的如诗如画的意境、田园牧歌式的生活、散文化的小说结构，在当代文坛上独树一帜。 本文从地域文化的视角出发，考察吴越文化对汪曾祺文学创作的深层影响，并分析他对中国当代抒情体小说所做的贡献。 本文的中心论点是：在吴越文化的诗性品格影响下，汪曾祺致力于心灵自由的追求。本论文分三个部分来探讨吴越文化对汪曾祺的审美和文学创造的影响。第一章主要从吴越文化的自然和风俗，并结合自然、风俗与文学诗性的关系来分析汪曾祺小说的审美观...

董元恺《苍梧词》的文化解读

作者：李娟  学位年度：2012-01-01 学位授予单位：西南大学 关键词：董元恺 《苍梧词》 道家文化 民俗文化 吴越文化 

描述：董元恺《苍梧词》的文化解读

绍兴黄酒麦曲品质及其影响因素的研究

作者：陈建尧  学位年度：2008-01-01 学位授予单位：江南大学 关键词：绍兴黄酒 黄酒麦曲 黄酒酿造 理化指标 麦曲品质 模糊综合评价 

描述：结果对麦曲进行等级划分。其中第一等级黄酒麦曲的糖化力为815U/g绝干曲，蛋白质分解力为40U/g绝干曲；第二等级和第一等级麦曲的酶活较接近，各样品之间相差不大。而第三等级的黄酒麦曲一般曲心发黑，糖化力为676U/g绝干曲，蛋白质分解力为38U/g绝干曲。第一、二等级麦曲微生物区系分布较均匀，主要是米曲霉、伞枝犁头霉、微小根毛霉、阿姆斯特丹散囊菌，这些真菌数量较多；而第三等级麦曲菌丝较少，菌数量不多，部分样品所含的真菌较杂。通过对不同等级黄酒麦曲的酿酒试验，第一等级麦曲发酵前缓后挺，不同于第三等级麦曲发酵开始很快，随后变慢的特点。第一、二等级的黄酒麦曲所酿的酒在感官风味上比较一致，而第三等级麦曲由于发酵不完全，成品酒风味欠佳。 通过对制曲过程中的麦曲真菌RISA指纹图谱分析，黄酒麦曲在制曲过程中的主要真菌是米曲霉、伞枝犁头霉、微小根毛霉、伯顿毕赤酵母、扣囊复膜孢酵母、Issatchenkiaorientali和葡萄牙棒孢酵母。其中米曲霉在麦曲制曲过程的第二阶段大量存在，并在数量上占绝对优势。对麦曲制曲过程中糖化力的变化发现，麦曲糖化力在第二阶段也有一个显著上升的趋势，从第7天531U/g绝干曲的上升到第17天的1927U/g绝干曲，糖化力是第7天的3.63倍。 通过对麦曲制曲过程中的影响因子研究，米曲霉、黄曲霉、伞枝犁头霉是黄酒厂的主要真菌。小麦原料和稻草中所含的真菌最多。麦曲制曲过程中出现的米曲霉在麦曲刚压制成型时来自于原料小麦，在制曲过程中受环境空气及制曲工具的影响而使麦曲中米曲霉大量生长繁殖。制曲过程中出现的伞枝犁头霉主要是稻草通过前期的人工覆盖接入的。

绍兴黄酒麦曲中微生物群落结构的研究

作者：张中华  学位年度：2012-01-01 学位授予单位：江南大学 关键词：绍兴黄酒 麦曲 分离培养 变性梯度凝胶电泳 微生物群落 

描述：落结构。为准确阐述麦曲在黄酒发酵过程中的作用以及指导制曲工艺的改进提供了一定的理论基础。本研究分别利用LB培养基、YP培养基、MRS培养基和麦曲浸提液培养基、马铃薯培养基、察氏培养基对麦曲中的细菌、真菌进行了分离培养和鉴定。细菌的鉴定结果表明：机制曲中有芽孢杆菌属和葡萄球菌属的细菌；手工曲有芽孢杆菌属及少量泛菌属、肠球菌属的细菌；熟麦曲中有葡萄球菌属，还有少量泛菌属和芽孢杆菌属的细菌。真菌的鉴定结果表明：机制曲中有根霉属、横梗霉属、曲霉属、链格孢属、散囊菌属和毛霉属的真菌，手工曲中有根霉属、横梗霉属、毕赤酵母属和毛孢子菌属的真菌，熟麦曲分离鉴定出曲霉属、毕赤酵母属和毛孢子菌属的真菌。本研究还利用PCR-DGGE技术对这三种麦曲样品中的微生物进行了分析鉴定。细菌PCR-DGGE的分析结果表明，三种麦曲中均有糖多孢菌属、肠杆菌属等多个属种的细菌；而在手工曲中鉴定出了高温放线菌属的微生物，这与传统分离培养方法的结果是相互补充的。芽孢杆菌的PCR-DGGE分析表明：机制曲和手工曲中鉴定出枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，这与传统分离培养方法的结果是相互支持的，但熟麦曲中未鉴定出芽孢杆菌属的细菌。真菌的PCR-DGGE分析结果表明，三种麦曲均有疏棉状嗜热丝孢菌；机制曲和手工曲均有横梗霉属、犁头霉属的真菌；机制曲和熟麦曲有西弗冠孢酵母和黑曲霉。此外，机制曲中还有米黑根毛霉、蜡叶散囊菌和微小根毛霉等，手工曲中还有镰孢菌属等属的真菌。其中，镰孢菌属的真菌和疏棉状嗜热丝孢菌是绍兴黄酒麦曲以前未曾报道过的微生物。

绍兴黄酒麦曲中微生物的初步研究

作者：方华  学位年度：2006-01-01 学位授予单位：江南大学 关键词：绍兴黄酒 麦曲 丝状真菌 ITS rDNA RISA 

描述：。分析了绍兴地区3个黄酒厂麦曲样品中真菌的RISA图谱,建立3个麦曲RISA图谱的克隆文库,通过条带的测序得到3个麦曲样品的主要微生物均有伞枝犁头霉、酿酒酵母、微小毛霉、米曲霉、构巢裸孢壳。同时,发现地域环境影响着麦曲中的优势微生物。采用RISA指纹图谱技术分析了在制曲过程中麦曲中数量占优势的真菌变化的过程。根据图谱条带的变化,发现在制曲过程中,麦曲中优势真菌先增加后下降。初步研究了麦曲7株优势真菌的产酶情况,其中Aspergillus oryzae AO-01产α-淀粉酶、糖化酶、蛋白酶,活力分别为112.5 u/g干曲、1359.4 u/g干曲、817.6 u/g干曲,能够用作为黄酒纯种酿造的菌株。而其它的6株真菌由于液化酶和糖化酶不产或产量很低,不能有效地将淀粉原料分解为酵母能利用的葡萄糖。在真菌混合...

绍兴黄酒的陈酿特性与指纹图谱检测方法及装置研究

作者：沈飞  学位年度：2012-01-01 学位授予单位：浙江大学 关键词：黄酒 绍兴黄酒 陈酿特性 风味成分 指纹图谱 红外光谱 定量分析 定性分析 

描述：品质越来越高的要求极不相称,阻碍了黄酒产业进一步的发展与壮大。本研究是对本课题组前期研究(基于近红外光谱的绍兴黄酒风味成分与酒龄的检测分析)的进一步深入和拓展,目的是建立黄酒不同陈酿阶段以及酒龄的指纹图谱快速检测方法,为黄酒产品质量控制、风险评估提供新手段、新装备。本文以绍兴黄酒为研究对象,综合利用仪器分析、可见/近红外、近红外和中红外光谱技术,对绍兴黄酒的陈酿特性及其酒龄和品质的指纹图谱检测方法和装置开展了研究,获取了基于黄酒中多类化学组分以及近红外光谱的黄酒酒龄特征指纹图谱；建立并对比了黄酒多种风味成分的近红外、中红外光谱定量分析模型；分析了温度对黄酒品质可见/近红外光谱检测精度的影响,确定了最佳检测温度水平,在此基础上开发了基于温度控制的黄酒品质实时检测系统。本文的主要研究结果和结论如下：(1)对2007年冬酿绍兴黄酒在陈酿3至45个月时间范围内,各种特征风味成分的含量变化进行了动态追踪检测。结果表明,在黄酒陈酿过程中：①6项常规指标中,酒精度和总糖含量呈下降趋势,非糖固形物和总酸含量则稳步上升,氨基酸态氮和pH的变化趋势不明显。除pH外,其余指标的含量随陈酿过程存在显著差异；②乳酸与总酸一致,含量不断增加,并存在显著性差异；③5个糖类指标中,葡萄糖含量变化趋势不明显,未检测出显著性差异。麦芽糖、异麦芽糖、潘糖和异麦芽三糖则存在显著性差异,但无明显变化趋势；④黄酒中的9种主要金属离子元素(Na、Mg、 A1、K、Ca、Mn、Fe、Cu、Zn)的含量在陈酿过程中均存在一定波动,无明显增加或降低趋势。除Ca与Cu外,其它7种元素均存在显著性差异；⑤16种游离氨基酸指标中,天门冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸及总氨基酸含量在陈酿过程中均有降低趋势,其余7种氨基酸(苏氨酸、丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸)含量总体保持稳定。除天门冬氨酸、甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸外,其余氨基酸的含量均存在显著差异；⑥11种挥发性成分指标(异丁醇、异戊醇、2,3-丁二醇、β-苯乙醇、丙三醇、乙酸乙酯、丁酸乙酯、乳酸乙酯、壬醛、苯甲醛、癸酸乙酯)中,异丁醇、异戊醇、壬醛、苯甲醛含量在陈酿中有所降低,丙三醇含量出现上升,其余指标含量均出现一定波动,无显著变化规律。结果表明,黄酒中的大部分常规指标、乳酸、金属离子、氨基酸等化学组分,在陈酿过程中均参与了复杂的物理化学变化,使得其含量经历了显著的变化。但黄酒中主要糖类指标,葡萄糖的含量未检测出显著性差异,可推断糖类指标在陈酿过程中变化不大。由于所用检测方法的限制,11种挥发性成分中大部分指标未发现有明显变化趋势,其陈酿机理有待进一步研究。(2)建立了基于以上各类化学组分的黄酒酒龄判别模型。结果如下：①基于6项常规指标主成分得分的SLDA1、以及基于其组分含量的SLDA2和PLS-DA酒龄判别正确率分别为50.6%,48.7%和75.7%；②基于5种糖类指标的SLDA1、SLDA2和PLS-DA酒龄判别模型的判别正确率分别为39.3%,36.4%和66.5%；③基于9种金属离子的SLDA1、SLDA2和PLS-DA酒龄判别模型的判别正确率分别达到72.7%,73.4%和81.4%；④综合常规指标、乳酸、糖类以及金属离子四类化学指标,所建立的SLDA1、 SLDA2和PLS-DA判别模型对酒龄的判别正确率分别为91.0%,86.6%和91.2%；⑤基于16种氨基酸指标的SLDA1、SLDA2和PLS-DA酒龄判别模型的判别正确率达到86.4%,85.6%和91.2%；⑥基于11种挥发性成分指标所建立的SLDA1、SLDA2和PLS-DA模型对酒龄的判别正确率分别为90.6%,90.6%和92.1%。结果表明,综合常规指标、乳酸、糖类和金属离子,以及氨基酸、挥发性成分所建立的酒龄判别模型,最佳判别正确率均超过90%,可用于黄酒酒龄鉴别和酒龄指纹图谱检测方法的建立。(3)分析了不同陈酿阶段黄酒基酒以及不同标注酒龄勾兑酒在800nm-2500nm范围内的近红外光谱,发现两者的光谱吸收特征一致,主要吸收峰均位于1455nm、1692nm、1776nm、2266nm、2302nm以及1900-1950nm处,与黄酒中的糖、酸、氨基酸等风味成分中的主要基团C-H、O-H、N-H等的吸收密切相关。主成分分析结果显示,不同酒龄的基酒和勾兑酒样品的均有明显聚类趋势。基于LDA、LS-SVM以及PLS-DA三种模式识别方法所建立的基酒酒龄判别模型,其建模集判别正确率分别为93.6%,98.7%和94.4%,预测集判别正确率分别为96.3%,91.3%和95.2%；勾兑酒酒龄的LDA、LS-SVM、PLS-DA以及DPLS模型的建模集判别正确率分别为85.0%,100%,99.2%和100%,预测集判别正确率分别为72.5%,87.5%,86.3%和95.0%。结果表明近红外光谱能提取不同酒龄黄酒的整体差异信息,可用于基酒以及勾兑酒的酒龄的检测分析和指纹图谱的建立。(4)建立了黄酒中的6项常规指标、乳酸、5种糖、16种氨基酸及总氨基酸含量的近红外、中红外光谱PLSR定量分析模型。①对常规指标和乳酸的分析结果表明,所建近红外、中红外光谱分析模型均可用于总糖、非糖固形物以及氨基酸态氮的定量分析(模型RPD>2.0),以及总酸、pH值、乳酸的定性分析(模型RPD>1.5)。除乳酸外,近红外光谱分析模型的性能均优于中红外光谱。②对糖类指标的分析结果表明,所建近、中红外光谱分析模型可用于葡萄糖含量的定量检测(模型RPD>2.0),异麦芽三糖的近红外光谱分析结果较优(模型RPD=1.95),而麦芽糖的中红外光谱分析结果较优(模型RPD=1.97),其余指标检测精度不佳,模型鲁棒性欠缺(模型RPD<1.5)。③对氨基酸指标的分析结果表明,近红外光谱分析模型性能普遍较优,除脯氨酸、苯丙氨酸、组氨酸以及总氨基酸外,其余指标定量分析模型的RPD值均超过1.5,其中,天门冬氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、精氨酸模型的RPD值大于2.0。而中红外模型的鲁棒性普遍欠缺,仅天门冬氨酸、谷氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸模型的RPD值大于或等于1.5,丝氨酸模型的RPD值接近1.5,具有定性分析能力,其它指标均低于1.50。除脯氨酸和精氨酸外,近红外光谱模型的整体性能均优于中红外光谱。结果表明,近红外、中红外光谱均可用于黄酒中主要常规指标、葡萄糖、乳酸,以及部分氨基酸指标的定量定性检测分析,近红外光谱分析模型的性能总体优于中红外光谱。(5)分析了5℃,10℃,15℃,20℃,25℃,30℃,35℃温度水平下黄酒样品的可见／近红外光谱(303-1700nm)的变化规律。原始光谱中,在1340-1480nm波段范围内,在高频(短波)波段,吸收峰随着温度的上升而逐渐增高,反之,在低频(长波)波段,吸收峰随着温度上升而不断降低。二阶微分光谱中,在1320nm和1358nm处的吸收峰值随温度上升而增强,而1404nm处峰值随温度上升而降低。主成分分析结果显示不同温度下的样品光谱有较明显的聚类趋势,表明温度对黄酒的可见／近红外光谱影响显著。由于氢键结合会使得水分子的伸缩振动向高频转移,而弯曲振动则向低频转移。温度越高会促使氢键发生结合,从而伸缩振动会向高频(短波)转移,由此造成样品光谱发生变化。建立了不同温度下黄酒品质指标的SMLR定量分析模型,确定了酒精度、总糖、非糖固形物、总酸以及氨基酸态氮的最佳检测温度分别为：15℃,20℃,20℃,15℃和20℃。酒精度、总糖模型的精度较高,鲁棒性优(模型RPD>2.5),总酸模型精度一般,仅具有定性分析能力(模型RPD>1.5),非糖固形物以及氨基酸态氮模型精度不佳(模型RPD<1.5)。运用7个温度下的黄酒样品光谱建立了酒精度、总糖和总酸的温度补偿检测模型。结果表明,酒精度的温度补偿效果较优(模型RPD=3.81),而总糖和总酸温度补偿效果不佳(模型RPD<1.5)。利用蔡司便携式光谱仪及其外部程序开发包、光纤、控温样品池,构建和开发了基于可见／近红外光谱的黄酒品质(酒精度、总糖以及总酸)实时检测的软、硬件系统,并对该检测装置的性能进行了实验验证。在15℃水平下,对37个样品的检测结果为：①酒精度的预测相关系数rp、RMSEP以及RPD值分别为0.979,0.464%和3.78；②总糖的rp, RMSEP以及RPD值分别为0.766,5.78g/L和1.50；③总酸的rp、RMSEP以及RPD值分别为0.630,0.664g/L和1.24。结果表明该检测系统可用于酒精度的准确定量检测,但总糖和总酸指标的检测精度不佳,模型精度有待提升。

绍兴黄酒抑制LDLR<'-/->小鼠MMP-2表达和动脉粥样硬化斑块形成

作者：刘龙斌  学位年度：2009-01-01 学位授予单位：温州医学院 关键词：绍兴黄酒 LDL受体 基质金属蛋白酶 同型半胱氨酸 动脉粥样硬化 

描述：氨酸)喂养形成高同型半胱氨酸血症并致动脉粥样硬化模型，14周后处死小鼠，检测血脂及同型半胱氨酸水平；观察胸腹主动脉粥样硬化情况；测定基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平；观察主动脉窦部切片H&E和免疫组化染色。 主动脉标本处理： 取血后经左心室冰PBS灌流，高位心脏连同近段主动脉约1mm处离断血管。清除胸腹主动脉周围脂肪组织后，纵向分离血管至肾动脉。主动脉(每组6只)10％福尔马林固定24小时后行70％酒精漂洗30秒，苏丹Ⅳ染色15分钟，80％酒精分化20分钟，流水冲洗1小时。XTZ-E体视显微镜接上尼康D60数码相机，行胸腹主动脉拍照，Image-pro plus6.0图像分析系统分析动脉粥样硬化面积。 H&E染色及免疫组化分析： 石蜡包埋心脏，从高位心脏处以20μm厚连续切片至出现主动脉瓣的圆形动脉组织后，以4μm厚连续切片至瓣上约200μm处，每隔5张切片留取1张行常规H&E染色及MMP-2免疫组化检测(一抗为1：50，Sigma Aldrich公司，产品号：M4065；检测系统为Dako REALTM EnVisionTM，产品号：K5007)。MMP-2免疫组化方法为：常规脱蜡，梯度酒精水化，消除内源性过氧化物酶，高温高压抗原修复，二步法行免疫组化检测。采用LEICA DC3000拍照及Image-Pro Plus6.0软件进行资料分析。 明胶酶谱法： 用组织匀浆机切碎主动脉弓(每组6只)，提取主动脉弓处蛋白20ug。在含1mg/mL明胶的10％聚丙烯酰胺凝胶片上电泳，待溴酚蓝到达凝胶底部，在室温下用含2.5％ Triton X-100洗涤缓冲液平摇洗涤30 min×2；37℃摇床平摇孵育缓冲液(pH8.8，50 mmol/L Tris-HCl，5mmol/L CaCl2，0.02％NaN3)中孵育42小时。然后凝胶染色2h(含0.1％考马斯亮兰R-250溶液，10％冰乙酸，45％甲醇溶液，45％去离子水)，脱色(10％冰乙酸，45％甲醇溶液，去离子水45％)直到蓝色背景下出现白色条带，即为MMP-2，双蒸水冲洗终止脱色。用凝胶成像系统进行拍照，用Quantity One4.4软件定量分析。 结果： 1.实验中小鼠平均每日的饮水量约为4ml，饮酒量约1ml，相当于成人每日少量饮酒(1-2杯)。小鼠食物摄入量、饮水量、体重增加量在3组间无明显差别。 2.绍兴黄酒组小鼠血同型半胱氨酸较对照和红葡萄酒组明显下降，但三组间TC、TG、及HDL-C水平无明显差别。 3.所有实验小鼠的主动脉弓处都有粥样硬化斑块形成，其中对照组小鼠最为明显。与对照组相比，绍兴黄酒与红葡萄酒组的主动脉粥样硬化斑块面积减少了33.4％和35.7％(P<0.01)，绍兴黄酒和红葡萄酒组间无统计学差异。绍兴黄酒，红葡萄酒和对照组主动脉窦部粥样硬化面积分别为193392±27171μ㎡/section，188435±26193μ㎡/section和243476±29176μ㎡/section，绍兴黄酒和红葡萄酒与对照组比较均有显著差异(P0.05)。 4.与对照组相比，主动脉窦处绍兴黄酒组与红葡萄酒组的MMP-2的表达分别减少了26.8％和25.7％(P<0.001)，但绍兴黄酒和红葡萄酒组之间无统计学差异。明胶酶谱分析主动脉弓MMP-2+pro MMP-2表达分别减少了32.6％和30.2％(P<0.001)，绍兴黄酒组和红葡萄酒组之间无统计学差异。免疫组化染色显示MMP-2的表达主要位于动脉粥样硬化斑块纤维帽下和溃疡处。 结论： 绍兴黄酒能减低LDL受体基因缺陷小鼠血浆同型半胱氨浓度。绍兴黄酒和红葡萄酒均能抑制MMP-2的表达和减轻动脉粥样硬化斑块的形成，这可能是它们对心血管系统保护作用的机制之一。

绍兴黄酒对同型半胱氨酸诱导的大鼠血管内皮细胞基质金属蛋白酶-2表达的影响

作者：季政  学位年度：2013-01-01 学位授予单位：温州医学院 关键词：绍兴黄酒 动脉粥样硬化 血管内皮细胞 基质金属蛋白酶 2表达 同型半胱氨酸 免疫印迹法 

描述：)与血管内皮细胞共同孵育48 h及100μmol/L Hcy与血管内皮细胞共同培养24、48、72 h，分别用荧光定量PCR(FQ-PCR)、免疫印迹法和明胶酶谱法检测Hcy对培养的血管内皮细胞MMP-2mRNA、蛋白表达及酶解活性的影响，确定各实验最佳的Hcy刺激浓度和刺激时间。每种酒(1.0、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0％)与100μmol/L Hcy共同孵育VECs48 h， MTT法检测各酒精度的酒对血管内皮细胞活性的影响，确定各种酒的最佳干预浓度后，最终干预组依次分为正常组，Hcy组，Hcy+黄酒组，Hcy+红葡萄酒组，Hcy+酒精组5组。培养48 h后收集各组样品，FQ-PCR检测血管内皮细胞中MMP-2 mRNA水平，免疫印迹法检测血管内皮细胞中MMP-2蛋白表达量，明胶酶谱法测定血管内皮细胞上清液中MMP-2的酶解活性。
结果:
1.实时荧光定量PCR检测各组MMP-2 mRNA水平
(1)不同浓度Hcy对VECs MMP-2 mRNA表达的影响:MMP-2 mRNA表达在Hcy浓度为50μmol/L、100μmol/L、500μmol/L、1000μmol/L时均高于Hcy为0μmol/L(P＜0.01)，当Hcy浓度升至500μmol/L时，MMP-2 mRNA表达开始达到最高。
(2) Hcy作用不同时间对VECs MMP-2 mRNA表达的影响:MMP-2 mRNA表达在Hcy(100μmol/L)刺激24 h、48 h、72 h后均高于Hcy刺激0 h(P＜0.01)，且时间升至48h后达到最高。
(3)黄酒和红葡萄酒干预对VECs MMP-2 mRNA的表达的影响:与Hcy组相比VECs MMP-2 mRNA表达黄酒组和红酒组分别减少了31.1％和34.5％(P＜0.01)，酒精组减少6.5％(P＞0.05);与酒精组比较，黄酒组与红酒组MMP-2mRNA水平减少差异有统计学意义(P＜0.01);黄酒组和红酒组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。
2.免疫印迹法检测各组MMP-2蛋白在VECs中的表达量检测蛋白水平可以发现，Hcy能够促进VECs MMP-2的表达，在一定范围内可呈现浓度与时间的依赖性。
(1)不同浓度Hcy对VECs MMP-2蛋白表达的影响:Hcy在50～500μmol/L可以促进MMP-2蛋白表达上调，组间差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。
(2)不同作用时间Hcy对VECs MMP-2蛋白表达的影响:Hcy(100μmol/L)干预24，48，72 h时，可以发现其促进MMP-2蛋白表达，以48 h最明显(P＜0.01)。
(3)黄酒和红葡萄酒干预对VECs MMP-2表达的影响:相比Hcy组，VECsMMP-2表达在黄酒组和红酒组分别下降了29.1％和32.6％(P＜0.05)，酒精组下降5.3％(P＞0.05);相比酒精组，黄酒组与红酒组MMP-2表达下降的差异有统计学意义(P＜0.05);黄酒组与红酒组之间差异无统计学意义(P＞0.05)。
3.明胶酶谱法检测MMP-2在上清中的酶解活性明胶酶MMP-2在体内以酶原的形式进行合成与分泌，并在细胞外进行激活。用酶解明胶的量表示MMP-2的酶解活性的强弱，Hcy在50～500μmol/L时可以增强MMP-2的活性，随着Hcy浓度增强MMP-2酶解活性增强，组间差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。Hcy（100μmol/L）干预24，48，72 h，可以发现随着时间增加其促进MMP-2活性增强，并以48 h最明显(P＜0.01)。在最终的黄酒和红酒干预组中，与Hcy组相比，MMP-2活性黄酒组和红酒组分别下降了31.2％和33.8％(P＜0.05)，酒精组下降4.6％(P＞0.05);黄酒组、红酒组MMP-2活性下降与酒精组相比差异有统计学意义(P＜0.05);黄酒组与红酒组之间无统计学差异(P＞0.05)。
结论:
1.Hcy能增强大鼠血管内皮细胞MMP-2表达及酶解活性，在一定范围内随着Hcy浓度和刺激时间的增强而增强，可能在动脉粥样硬化发病机制中发挥重要作用。
2.小剂量绍兴黄酒和红葡萄酒均能抑制Hcy诱导的MMP-2表达及活化。
3.绍兴黄酒抑制MMP-2的表达和酶解活性可能是其抗动脉粥样硬化作用的机制之一。

绍兴黄酒功能性组分的检测与研究

作者：谢广发  学位年度：2005-01-01 学位授予单位：江南大学 关键词：绍兴黄酒 低聚糖 酚类物质 γ—氨基丁酸 肽 

描述：性酚和中性酚分组分离,并利用RP-HPLC分别对酸性酚和中性酚进行梯度洗脱分离和检测,测定了不同年份和不同工艺的绍兴黄酒样中儿茶素、表儿茶素、芦丁、绿原酸、阿魏酸等11种酚类化合物的含量。 2、在应用体积排阻色谱柱和钙型阳离子交换柱测定了黄酒样中糖分的分子量分布和单、双、三糖含量的基础上,利用氨基键合相柱对不同年份和不同工艺的绍兴黄酒样中异麦芽糖、潘糖、异麦芽三糖三种功能性低聚糖进行了定量分析研究。 3、利用OPA-FMOC柱前衍生高效液相色谱法首次检测出古越龙山黄酒样品中含有较丰富的生理活性成分抑制性神经递质γ—氨基丁酸(不同年份和不同工艺的绍兴黄酒样中γ—氨基丁酸含量为170～360 mg/L)。 4、对黄酒中的肽类组分进行了超滤、大孔吸附树脂柱层析和凝胶过滤色谱以及反相色谱的多步提取纯化与降血压...